骨質(zhì)疏松模型中鐵調(diào)素（Hepcidin）變化的相關(guān)研究

點擊次數(shù)：17519 發(fā)布時間：2013/9/12 10:31:21

觀察維甲酸灌胃建立制作的大鼠骨質(zhì)疏松模型;在模型建立過程中選定不同時間點,觀察大鼠肝臟的鐵調(diào)素（Hepcidin）基因表達變化以及相應時刻血清中鐵調(diào)素含量的觀察;在骨質(zhì)疏松研究領(lǐng)域,觀察、研究“鐵代謝調(diào)節(jié)因素（鐵調(diào)素）”在“骨代謝異常（骨質(zhì)疏松）”過程中的作用,為進一步研究骨質(zhì)疏松癥的機理、治療、轉(zhuǎn)歸提供新的思路、新的策略。方法:選擇3月齡清潔級雄性SD大鼠,分成模型組和對照組;模型組用維甲酸（70mg/kg/d）每天灌胃,對照組用等量的滅菌蒸餾水灌胃,連續(xù)14天。灌胃第5天、6天、7天、8天、9天、10天、11天、12天、14天分別處死大鼠取材:血清、肝臟組織、骨組織（脛骨、股骨、腰椎）。獲取骨質(zhì)疏松模型建立指標:灌胃前后大鼠活體骨密度測定、脫鈣骨切片分析、血清鈣、磷、堿性磷酸酶（ALP）;獲取肝臟相關(guān)研究結(jié)果:肝組織切片觀察、血清肝功能酶（ALT、AST、γ-GT）測定;采用RT-PCR方法分別觀察灌胃5天、6天、7天、8天、9天、10天、11天、12天、14天大鼠肝臟組織鐵調(diào)素基因表達水平;采用elisa試劑盒測定相應時間的血清中鐵調(diào)素的含量。結(jié)果:實驗第14天,模型組與對照組相比,模型組大鼠骨質(zhì)疏松模型建立成功:骨密度（脛骨、股骨、腰椎）不同程度的降低、骨HE切片中骨小梁稀松、皮質(zhì)骨變薄、軟骨細胞層減少等病理變化。模型建立過程中,與對照組比較,模型組所運用的維甲酸累積計量、累計時間未在肝臟組織HE切片發(fā)現(xiàn)明顯病理改變、血清肝功能酶含量沒有肝臟功能的損傷表現(xiàn)。在實驗周期內(nèi),模型組與對照組比較,肝臟鐵調(diào)素基因表達在維甲酸灌胃的不同時間,存在明顯差異:早期5、6、7天鐵調(diào)素基因相對表達量逐漸下降,在第8、9、10天達到較低值,隨后有回升,呈現(xiàn)凹陷的拋物線變化趨勢;而對照組基本處于水平的輕微波動變化。血清鐵調(diào)素ELISA檢測含量趨勢與對照組比較,呈現(xiàn)凹陷的拋物線變化,低值出現(xiàn)在第8、9、10天,整體變化趨勢與肝臟基因水平相符合;對照組變化亦與肝臟hepcidin基因水平相符合。結(jié)論:根據(jù)本次實驗結(jié)果,對骨質(zhì)疏松的病因病理的認識及鐵代謝與鐵調(diào)素、骨代謝與鐵代謝關(guān)系、鐵離子與鈣離子的關(guān)系系列研究的回顧,經(jīng)分析得出如下結(jié)論:1、本研究骨質(zhì)疏松模型采用單一人工干預方法,沒有其他影響因素;實驗結(jié)束時大鼠骨密度、骨組織學檢查表明骨質(zhì)疏松形成,同時肝臟功能酶和HE切片顯示肝臟功能未受藥源性產(chǎn)生明顯損傷性影響;因此,同期不同時間組大鼠肝臟鐵調(diào)素基因表達、血清鐵調(diào)素含量可以代表體內(nèi)鐵代謝不同時間的變化。2、在本研究中,模型組與對照組研究結(jié)果的差異表明:鐵調(diào)素基因RT-PCR變化、血清鐵調(diào)素ELISA測定含量變化與維甲酸制作的大鼠骨質(zhì)疏松模型形成有實驗相關(guān)性。3、在本研究平臺下,形成了一個互相影響的假設(shè)圖:鐵調(diào)素（Hepcidin）←→鐵代謝←→鐵離子←→鈣離子骨質(zhì)疏松。

原創(chuàng)作者：上海信帆生物科技有限公司