如何避免ELISA實驗中出現(xiàn)的各種問題

點擊次數(shù)：900 發(fā)布時間：2023/5/6 15:57:35

如何避免ELISA實驗中出現(xiàn)的各種問題

ELISA實驗失敗可能由多種因素造成。在實驗前閱讀并充分了解產(chǎn)品說明書，可以一定程度上避免出現(xiàn)意想不到的結(jié)果。參考以下提示來避免實驗出現(xiàn)問題。

1. 檢查試劑盒的保質(zhì)期，保證所有試劑按說明書上的建議正確保存；

2. 檢查試劑溶液是否存在不穩(wěn)定或降解跡象，如沉淀或變色等；

3. 底物溶液應(yīng)為無色；

4. 試劑制備和保存時應(yīng)使用干凈的一次性塑料吸量管、槍頭和容器。每次加液（樣品、標準品及其他試劑）時，及時更換槍頭，避免交叉污染；

5. 確保孵育時間和溫度與規(guī)定的高度一致；

6. 盒中試劑不能用其他試劑替代；

7. 建議樣本和標準品都做復(fù)孔，以提高實驗結(jié)果的準確性。

如何避免ELISA實驗中出現(xiàn)的各種問題

移液技術(shù)
1. 移液時，槍頭應(yīng)對準孔中央，避免接觸孔壁及底部。
2. 移液后輕輕晃動混勻試劑。
3. 如果您的樣品具有黏性，請預(yù)先潤洗槍頭以消除表面張力的影響。吸液時等待片刻使體積平衡后再取出。
4. 移液不充分或移液體積不均，說明移液器需要校正。必要時請檢查移液器并重新校正。
5. 加樣時，不同的試劑標準品和樣本間都要確保更換槍頭，避免交叉污染。
6. 確保使用合適的槍頭。不合適的槍頭無法正確量取吸液和加樣的體積。

洗滌技術(shù)
1. 如果使用自動洗板機或多通道移液器，請確保進出口能正常運作。
2. *后一次洗滌后，翻轉(zhuǎn)酶標板倒出多余的洗滌液，并在吸水紙上拍干液體。洗板太快或太慢都會降低精確度。不能讓孔內(nèi)液體自然風干，需立即進行下一步操作。
3. 按照說明書，添加足量的洗滌液至孔內(nèi)，并保證洗滌完全。
4. 由于洗滌液不是通用的，當試劑盒內(nèi)的洗滌液用完時，請不要使用其他試劑盒中的洗滌液。如有需要，可聯(lián)系技術(shù)支持尋求幫助。
5. 不要減少或增加洗滌時的浸泡時間或跳過浸泡的步驟。
6. 按照說明書上推薦的洗滌次數(shù)清洗，隨意改變洗滌的次數(shù)會影響實驗的精確性。

貯液瓶
為避免污染，不同的試劑使用不同的貯液瓶。一些試劑或樣本很容易被污染（比如唾液、氧化劑等），請參考說明書操作。必要時候采取一些預(yù)防措施保護溶液。另外，要保證盛放試劑或洗液的加樣槽的清潔度，避免造成污染。