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肉桂醇脫氫酶(CAD)(檢測服務(wù))
服務(wù)介紹:
肉桂醇脫氫酶(CAD)檢測試劑盒(肉桂酸比色法)檢測原理是以肉桂酸、NADP作為底物,在酶促反應(yīng)的*適條件下采用每隔一定時間測定產(chǎn)物生成量的方法,于分光光度計340nm處檢測吸光度,以吸光度變化所需酶量進行計算,主要用于植物組織的裂解液或勻漿液、血清等樣品中內(nèi)源性的肉桂醇脫氫酶活性,尤其適用于檢測水果中肉桂醇脫氫酶活性,25T可以檢測23~24個樣品。
背景介紹:
肉桂醇脫氫酶(CAD)是一種催化肉桂醇向肉桂酸轉(zhuǎn)化的酶。它屬于細(xì)胞木質(zhì)素合成途徑中的關(guān)鍵酶,多存在于高等植物、酵母、菌類等生物的可溶性部分。
檢測原理:
CAD催化肉桂醛和NADPH生成肉桂醇和NADP+,通過測定340nm下NADPH的消耗速率,即可反映CAD的活性。
操作步驟(僅供參考):
1.、準(zhǔn)備樣品:
①植物樣品:取1g植物組織或水果中層果肉置于液氮中迅速研磨或勻漿,加1~1.2ml預(yù)冷的CAD Lysis Buffer,4℃ 10000r/min離心15~20min,留取上清液
②血漿、血清和尿液樣品:血漿、血清按照常規(guī)方法制備后可以直接用于該試劑盒的測定,-20℃凍存,用于肉桂醇脫氫酶的檢測。
③細(xì)胞或組織樣品:取恰當(dāng)細(xì)胞或組織裂解液,如有必要用CAD Lysis Buffer進行適當(dāng)勻漿,4℃ 10000r/min離心15~20min,取上清液
④高活性樣品:如果樣品中含有較高活性的肉桂醇脫氫酶,可以使用CAD Lysis Buffer稀釋進行恰當(dāng)?shù)南♂尅?/font>
2、配制CAD Assay Buffer工作液:取1支NADP完全溶解于10ml CAD Assay Buffer,即為CAD Assay Buffer工作液
3、CAD加樣:按照下表設(shè)置對照管、測定管,溶液應(yīng)按照順序依次加入
加入物(ml) | 對照管 | 測定管 |
CAD Lysis buffer | 0.2 | - |
待測樣品 | - | 0.2 |
CAD Assay buffer工作液 | 0.8 | 0.8 |
4、CAD檢測:以對照管為對照(調(diào)零),比色杯光徑1.0cm,分光光度計立即測定340nm處測定管的吸光度(記為A測定0),37℃準(zhǔn)確孵育10min,立即加入0.05ml CAD終止液終止反應(yīng)(備選方案),以對照管為對照(調(diào)零),分光光度計立即測定340nm處測定管的吸光度(記為A測定1)。
實驗結(jié)果:
全自動生化儀檢測后導(dǎo)出結(jié)果,結(jié)果由EXCEL形式發(fā)送。
送樣須知:
1.南京和上海地區(qū)的客戶可提供上門取樣服務(wù),提前一天聯(lián)系
2.外地客戶可郵寄樣本,樣本運輸應(yīng)符合一般的生物學(xué)要求,密封加冰袋或者干冰運輸
3.若細(xì)胞、血清、組織樣本具有潛在的傳染性或致病性,請務(wù)必提前告知
4.測試結(jié)束提供實驗報告后,樣本可以保留1個月,若需保留樣本或者回收樣本請?zhí)崆案嬷?/font>
備注:本公司對客戶的項目的專有技術(shù)和資料(包括實驗方案,測試結(jié)果,樣本等)負(fù)有絕對保密的責(zé)任。
僅供科研實驗用,不做其他用途!
肉桂醇脫氫酶(CAD)(檢測服務(wù))
更新時間:2024/11/26 14:32:05
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