聯(lián) 系 人:莫經(jīng)理
電 話:4008-013-053
手 機(jī):13764793648
地 址:上海市閔行區(qū)顧戴路2988號7樓
郵 編:200000
傳 真:021-51870610
郵 箱:1170233632@qq.com
阿儀網(wǎng)商鋪:http://www.app17.com/c85413/
手機(jī)網(wǎng)站:m.shxfbio.com
植物丙二醛(MDA)(檢測服務(wù))
服務(wù)介紹:
植物丙二醛(MDA)檢測試劑盒(TBA比色法)(Plant MDA Assay Kit with TBA)又稱脂質(zhì)氧化(MDA)檢測試劑盒,是采用一種基于MDA和硫代巴比妥酸(thiobarbituric acid, TBA)反應(yīng)產(chǎn)生紅色產(chǎn)物的顯色反應(yīng),隨后通過比色法用于對植物組織(根、莖、葉、種子等)MDA進(jìn)行檢測,是專門用于植物脂質(zhì)氧化(lipid peroxidation)水平檢測的試劑盒,不適用于動物組織、細(xì)胞、血液等;丙二醛在較高溫度及酸性環(huán)境中可與TBA發(fā)生反應(yīng),形成紅色的MDA-TBA加合物,MDA-TBA加合物在532nm處有吸收,該復(fù)合物的吸光系數(shù)為155mmol/(L.cm),并且在600nm波長處有*小吸收,植物組織中糖類物質(zhì)對MDA-TBA反應(yīng)有干擾。
背景介紹:
丙二醛(MDA)是植物細(xì)胞膜脂過氧化程度的體現(xiàn),是膜脂過氧化作用的重要產(chǎn)物。MDA的產(chǎn)生與植物衰老及逆境傷害有密切關(guān)系,能夠直接反映膜的受損程度。
在植物器官衰老或在逆境條件下,活性氧自由基累積到一定濃度后,植物體內(nèi)葉綠素會遭到破壞,同時(shí)植物抗氧化機(jī)制開始作用,清除體內(nèi)的活性氧自由基。當(dāng)抗氧化機(jī)制不能將活性氧自由基的產(chǎn)生和清除維持在平衡狀態(tài)時(shí),過量的活性氧會導(dǎo)致組織或器官膜脂發(fā)生過氧化反應(yīng),進(jìn)而產(chǎn)生MDA。
操作步驟(僅供參考):
1、 樣本處理:
①制備MDA提取液:取適量的植物根、莖、葉子、種子等,稱量后剪碎,按每0.4g植物樣品加入4ml的比例加入組織勻漿液,充分勻漿(一般取0.4~1g植物樣品即可)。4000g離心10min,取上清液待用
②樣品準(zhǔn)備完畢后可以用BCA蛋白濃度測定試劑盒測定蛋白濃度,以便于后續(xù)計(jì)算單位蛋白重量植物樣品的MDA含量;測定蛋白濃度非必須步驟,亦可采用經(jīng)驗(yàn)公式計(jì)算。
2、配制TBA工作液:稱取適量TBA,用組織勻漿液配制成濃度為0.68%的TBA工作液,例如取0.068g TBA用10ml組織勻漿液配制,*終濃度即為0.68%的TBA工作液。
3、稀釋標(biāo)準(zhǔn)品:如果進(jìn)行簡易快速檢測,標(biāo)準(zhǔn)品直接稀釋至10μM;如果進(jìn)行精確檢測,取適量標(biāo)準(zhǔn)品用組織勻漿液稀釋至1、2、5、10、20、50μM;
4、樣品測定:
①分光光度計(jì)測定:在離心管或其它適當(dāng)容器內(nèi)加入1ml組織勻漿液作為空白對照,加入1ml MDA提取液用于測定,隨后加入1ml TBA工作液。
加入物質(zhì)(ml) | 空白管 | 標(biāo)準(zhǔn)管 | 測定管 |
組織勻漿液 | 1 | - | - |
標(biāo)準(zhǔn)品(可選步驟) | - | 1 | - |
MDA提取液 | - | - | 1 |
抗氧化劑 | 0.005 | 0.005 | 0.005 |
TBA工作液 | 1 | 1 | 1 |
②酶標(biāo)儀測定:在離心管或其它適當(dāng)容器內(nèi)加入200μl組織勻漿液作為空白對照,加入200μlMDA提取液用于測定,隨后加入200μl TBA工作液?蓞⒖枷卤碓O(shè)置檢測反應(yīng)體系,依次加入試劑:
加入物質(zhì)(μl) | 空白管 | 標(biāo)準(zhǔn)管 | 測定管 |
組織勻漿液 | 200 | - | - |
標(biāo)準(zhǔn)品(可選步驟) | - | 200 | - |
MDA提取液 | - | - | 200 |
抗氧化劑 | 1 | 1 | 1 |
TBA工作液 | 200 | 200 | 200 |
③混勻, 加蓋,95℃水浴煮沸30min,加熱時(shí)務(wù)必注意避免液體暴沸濺出。
④冷水浴或流水冷卻至室溫,4000g離心10min。
⑤取上清,蒸餾水調(diào)零,用分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀測定532nm處吸光度,分別記為A空白、A標(biāo)準(zhǔn)、A測定;
實(shí)驗(yàn)結(jié)果:
全自動生化儀檢測后導(dǎo)出結(jié)果,結(jié)果由EXCEL形式發(fā)送。
送樣須知:
1.南京和上海地區(qū)的客戶可提供上門取樣服務(wù),提前一天聯(lián)系
2.外地客戶可郵寄樣本,樣本運(yùn)輸應(yīng)符合一般的生物學(xué)要求,密封加冰袋或者干冰運(yùn)輸
3.若細(xì)胞、血清、組織樣本具有潛在的傳染性或致病性,請務(wù)必提前告知
4.測試結(jié)束提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告后,樣本可以保留1個(gè)月,若需保留樣本或者回收樣本請?zhí)崆案嬷?/font>
備注:本公司對客戶的項(xiàng)目的專有技術(shù)和資料(包括實(shí)驗(yàn)方案,測試結(jié)果,樣本等)負(fù)有絕對保密的責(zé)任。
僅供科研實(shí)驗(yàn)用,不做其他用途!
植物丙二醛(MDA)(檢測服務(wù))
更新時(shí)間:2024/11/26 14:32:05
首 頁| 公司介紹| 產(chǎn)品展示| 公司新聞| 榮譽(yù)證書| 資料下載| 技術(shù)文章| 聯(lián)系我們| 客戶留言
阿儀網(wǎng) 設(shè)計(jì)制作,未經(jīng)允許翻錄必究. 聯(lián)系人:莫經(jīng)理 聯(lián)系電話:4008-013-053 ICP備案號:滬ICP備13019554號 總訪問量:4978665 管理登錄
主營產(chǎn)品:實(shí)驗(yàn)代測 免疫組化檢測 PCR檢測 elisa試劑盒 抗體抗原 動物血清制品
掃一掃,關(guān)注我們