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植物超氧陰離子NBT染色(檢測服務(wù))
服務(wù)介紹:
植物超氧陰離子染色液(NBT法)檢測植物組織在脅迫環(huán)境條件下會產(chǎn)生多種活性氧(ROS),ROS活性非常大且極其不穩(wěn)定,因此ROS的檢測通常因其*終產(chǎn)物而定。超氧陰離子是活性氧的一種,屬于一種含氧自由基,能將NBT(氮藍(lán)四唑)還原成不溶于水的藍(lán)色甲瓚化合物,從而定位組織中的超氧陰離子。根據(jù)基本原理也稱其為NBT法。
原理:
超氧陰離子是活性氧的一種,屬于一種含氧自由基。NBT(氮藍(lán)四唑)能將超氧陰離子還原成不溶于水的藍(lán)色甲瓚化合物,從而定位組織中的超氧陰離子。
應(yīng)用:
1、主要用于檢測新鮮植物組織中的活性氧(ROS),特別是超氧陰離子。
2、一般應(yīng)用于較嫩的根尖、葉片等的整體染色。
操作步驟(僅供參考):
1、試劑準(zhǔn)備:
將50 mg NBT加入到100 mL磷酸緩沖液(pH 7.4)中充分溶解,制成NBT染色工作液。
注意:如較難溶解,可通過超聲、磁力攪拌等方法促溶。
2、樣本準(zhǔn)備:
采集新鮮的植物葉片或根,用自來水稍洗凈,置于濾紙上吸干多余水分。
3、染色:
將植物幼苗或根尖浸入NBT染色工作液中,常溫避光浸染2~6小時,直至陽性部位出現(xiàn)深藍(lán)色。
4、脫色:
用鑷子將植物幼苗或葉片小心取出,浸入蒸餾水中漂洗數(shù)次,再浸入95%乙醇中40℃處理3~16小時,目的是脫去植物本身的葉綠素或淡藍(lán)色背景。
5、觀察:
將樣本轉(zhuǎn)入適量NBT樣本保存液中浸泡30分鐘后,取出拍照。
注意事項:
1、NBT染色工作液配制后需2-8℃避光保存,一月內(nèi)使用。
2、植物樣本需要新鮮采集,并盡快完成染色。
3、染色和脫色步驟的時間可能因植物種類和幼嫩程度而異。
送樣須知:
1.南京和上海地區(qū)的客戶可提供上門取樣服務(wù),提前一天聯(lián)系
2.外地客戶可郵寄樣本,樣本運輸應(yīng)符合一般的生物學(xué)要求,密封加冰袋或者干冰運輸
3.若細(xì)胞、血清、組織樣本具有潛在的傳染性或致病性,請務(wù)必提前告知
4.測試結(jié)束提供實驗報告后,樣本可以保留1個月,若需保留樣本或者回收樣本請?zhí)崆案嬷?/font>
備注:本公司對客戶的項目的專有技術(shù)和資料(包括實驗方案,測試結(jié)果,樣本等)負(fù)有絕對保密的責(zé)任。
僅供科研實驗用,不做其他用途!
植物超氧陰離子NBT染色(檢測服務(wù))
更新時間:2024/11/26 14:32:05
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