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重組核心鏈霉親和素(r-cSA)
品 名:重組核心鏈霉親和素(r-cSA)
英文名稱:Recombinant Core Streptavidin
規(guī) 格:1 mg ,10 mg ,100 mg ,500 mg
產(chǎn)品形式:冷凍干粉(20mM HEPES 緩沖液、海藻糖、TCEP ,pH 7.0)
分 子 量:四聚體 54.0kDa,單體 13.5kDa
活 性:≥15 U/mg 蛋白(Green 改良法測定)
純 度:≥95%(SDS-PAGE 檢測)
濃度測定:紫外吸收法,消光系數(shù) E(0.1% at 280 nm)=3.11
內(nèi) 毒 素:≤5EU/mg
來 源:大腸桿菌發(fā)酵工程菌株
保存條件:-20℃保存
相關(guān)介紹:
鏈霉親和素(Streptavidin,SA)是阿維丁鏈霉菌(Streptomyces avidinii)在生長過程中分泌的一 種同型四聚體蛋白。同親和素一樣,一摩爾的鏈霉親和素可以結(jié)合四摩爾的生-物素,與生物-素具有 很高的親和力。由于鏈霉親和素不含糖基且等電點接近于中性,因此鏈霉親和素在檢測應(yīng)用中具有 比親和素更低的非特異性結(jié)合水平。重組核心鏈霉親和素與天然鏈霉親和素相比,去除與活性無關(guān) 的序列,僅保留與活性有關(guān)的核心序列,穩(wěn)定性、溶解性等方面均優(yōu)于天然鏈霉親和素,并且在 C 端添加了半胱-氨酸,可以定向與載體共價鍵合。(該重組鏈霉親和素 pI:6.04)
該制品已被廣泛應(yīng)用于多種生物技術(shù)領(lǐng)域,諸如:包被免疫檢測用微孔板,制備 SA 偶聯(lián)酶制劑,SA 偶聯(lián)熒光素、SA 偶聯(lián)磁珠等,進而參與酶聯(lián)免疫吸附和酶催化放大實驗,免疫組化化學、生物分子純化、生物傳感器、生物納
使用方法:(僅供參考)米微球、預(yù)靶向制藥研究和生物芯片被料等。
由于產(chǎn)品生產(chǎn)工藝中凍干環(huán)節(jié)會引入保護劑等,為減少您的實驗誤差,建議先通過內(nèi)部檢測方法,產(chǎn)品中蛋白進行準確定量后,再進行后續(xù)實驗,并按實際情況進行產(chǎn)品用量調(diào)整。建議優(yōu)先選擇紫外吸收法進行定量,方法如下:
將樣品從低溫條件下拿出后,平衡至室溫,并擦去瓶外附著的冷凝水,小心打開瓶蓋,防止干粉飛濺損失。用去離子水或緩沖液進行復(fù)溶,充分溶解后,稀釋至合適濃度,小心移入比色皿中,以去離子水或緩沖液為空白對照,測定樣品在280 nm 處的吸光值(建議吸光值控制在0.1-1.5 區(qū)間內(nèi)),將其代入以下公式計算蛋白質(zhì)濃度:
式中:C:樣品原液的蛋白質(zhì)質(zhì)量濃度(mg/mL)
A280nm :蛋白質(zhì)溶液在 280nm 處測得的吸光值 N:稀釋倍數(shù)
E(0.1% at 280nm) :1 mg/mL 蛋白質(zhì)的消光系數(shù)
例如將本產(chǎn)品凍干粉充分溶解并混勻后,取適量原液稀釋 10 倍,測得其在 280 nm 處的吸光值為 0.933,則原液的蛋白濃度為 10×0.933/3.11=3 mg/mL。
注意事項:
1. 重組核心鏈霉親和素凍干粉易溶于水,溶解性可達10 mg / mL 或更高;
2. 建議使用純水溶解;
3. 如有未溶解物質(zhì),建議延長復(fù)溶時間。也可以通過離心或其他方式除去不溶物后,再用于后續(xù)實驗,不會對總蛋白產(chǎn)生很大的影響。
4. 考慮到蛋白質(zhì)特殊性,凍干粉建議現(xiàn)用現(xiàn)配,溶解后應(yīng)避免反復(fù)凍融,如需多次使用,建議按需分裝后凍存(-20℃);避免在4℃下長期存放。
更新時間:2024/11/26 14:32:05
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