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產(chǎn)品名稱:人細(xì)胞間粘附分子1 ELISA檢測(cè)試劑盒
英文名稱:Human ICAM-1 ELISA Kit
產(chǎn)品貨號(hào):XFH12875
規(guī)格:48T/96T
儲(chǔ)存條件:2-8℃
有效期:6個(gè)月
用途:本試劑盒用于體外定量檢測(cè)血清、血漿、組織勻漿及相關(guān)液體樣本中人細(xì)胞間粘附分子1(ICAM-1)的含量。
本產(chǎn)品僅供科研實(shí)驗(yàn)用,不做其他用途!
背景介紹:
ICAM-1(細(xì)胞間粘附分子1)也被稱為CD54(分化簇54),是一種蛋白質(zhì),由ICAM1基因編碼,通常在內(nèi)皮細(xì)胞和免疫系統(tǒng)細(xì)胞中表達(dá)。它與CD11a/CD18或CD11b/CD18型整合素結(jié)合,也被鼻病毒利用作為進(jìn)入呼吸道上皮的受體。ICAM-1是免疫球蛋白超家族的一個(gè)成員,該超家族的蛋白質(zhì)包括抗體和T細(xì)胞受體。它是一種跨膜蛋白,擁有一個(gè)氨基端胞外結(jié)構(gòu)域、一個(gè)跨膜結(jié)構(gòu)域和一個(gè)羧基端胞質(zhì)結(jié)構(gòu)域。
檢測(cè)原理:
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被人細(xì)胞間粘附分子1(ICAM-1)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體,經(jīng)過溫育并徹-底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成*終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人細(xì)胞間粘附分子1(ICAM-1)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測(cè)定吸光度(OD 值),計(jì)算樣品濃度。
特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)
重復(fù)性:板內(nèi)變異系數(shù)小于10% ,板間變異系數(shù)小于15%
樣品收集、處理及保存方法
以下只是列出樣品采集的一般指南。所有樣本采集過程中,不得使用疊氮鈉做為防腐劑。
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,將收集于血清分離管的全血標(biāo)本在室溫放置2小時(shí)或4℃過夜,然后1000×g離心20 分鐘,取上清即可,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2. 血漿:用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標(biāo)本,并將標(biāo)本在采集后的30分鐘內(nèi)于2-8℃ 1000×g離心15分鐘,取上清即可檢測(cè),或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
3. 細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本:請(qǐng)1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測(cè),或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
4. 組織勻漿:用預(yù)冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細(xì)胞會(huì)影響測(cè)量結(jié)果),稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對(duì)應(yīng)體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣品對(duì)應(yīng)9mL的PBS,具體體積可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要適當(dāng)調(diào)整,并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞,可以對(duì)勻漿液進(jìn)行超聲破碎,或反復(fù)凍融。*后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,取上清檢測(cè)。
注:標(biāo)本溶血會(huì)影響*后檢測(cè)結(jié)果,因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項(xiàng)檢測(cè)。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
人細(xì)胞間粘附分子1 ELISA檢測(cè)試劑盒
更新時(shí)間:2024/11/26 14:32:05
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