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      人內(nèi)分泌腺來源的血管內(nèi)皮生長因子(EG-VEGF)ELISA 試劑盒

      人內(nèi)分泌腺來源的血管內(nèi)皮生長因子(EG-VEGF)ELISA 試劑盒

      價格:電議 型號:

      原產(chǎn)地:中國大陸發(fā)布時間:2013/7/10 10:07:33

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      本產(chǎn)品僅供科研實驗,不得用于醫(yī)療或食用。

      【產(chǎn)品中文名稱】 人內(nèi)分泌腺來源的血管內(nèi)皮生長因子(EG-VEGF)ELISA 試劑盒  
      【產(chǎn)品英文名稱】 Human Endocrine gland vascular endothelial growth factor,EG-VEGF ELISA kit 
      【保存溫度】 2-8℃,避光保存  
      【產(chǎn)品規(guī)格】 96T/48T 
      【有效期】  6個月 
      人內(nèi)分泌腺來源的血管內(nèi)皮生長因子(EG-VEGF)ELISA 試劑盒  
      操作流程  
      1. 加入10 μL 校準(zhǔn)品、質(zhì)控品、待測樣品到反應(yīng)板孔內(nèi);  
      2. 加入100 μL酶標(biāo)抗體工作液到反應(yīng)板孔內(nèi);  
      3. 室溫?fù)u床溫育120 min;  
      4. 洗板6次;  
      5. 加入1X底物工作液100 μL;  
      6. 室溫溫育15 min;  
      7. 加入100 μL終止液,搖勻約5 s;  
      8. 用波長325 nm/420 nm的激發(fā)/發(fā)射光檢測
       
       
       
       
       
      人內(nèi)分泌腺來源的血管內(nèi)皮生長因子(EG-VEGF)ELISA 試劑盒  
      注意事項如下:  
      1. 正式試驗時,應(yīng)分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件,待檢樣品應(yīng)作一式二份,以保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性。  
           有時本底較高,說明有非特異性反應(yīng),可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。  
      2. 在ELISA中,進(jìn)行各項實驗條件的選擇是很重要的,其中包括:  
      (1) 固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。  
           其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進(jìn)行篩選:  
           用等量抗原包被,在同一實驗條件下進(jìn)行反應(yīng),觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。  
      (2)包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時,要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0~9.6之間。  
         吸附溫度,時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18~24小時。蛋白質(zhì)包被的適濃度需進(jìn)行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)  
         進(jìn)行包被后,在其它試驗條件相同時,觀察陽性標(biāo)本的OD值。選擇OD值大而蛋白量少的濃度。對于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1~10μg/ml。  
      (3) 酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價的滴定(見酶標(biāo)記抗體部份)。  
          然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實驗系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度。  
      (4) 酶的底物及供氫體的選擇:對供氫體的選擇要求是價廉、安全、有明顯地顯色反應(yīng),而本身無色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,應(yīng)注意防護(hù)。  
         有條件者應(yīng)使用不致癌、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時間后,應(yīng)加入強酸或強堿以終止反應(yīng)。  
          通常底物作用時間,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入 具體事項請來電咨詢。  
      人內(nèi)分泌腺來源的血管內(nèi)皮生長因子(EG-VEGF)ELISA 試劑盒  
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      更新時間:2024/11/26 14:28:39

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