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原產(chǎn)地：中國大陸發(fā)布時間：2013/7/12 9:42:16
采購度：334
本產(chǎn)品僅供科研實驗，不得用于醫(yī)療或食用。
| 【產(chǎn)品中文名稱】 | 人肝細胞生長因子（HGF）ELISA 試劑盒 | ||||||||
| 【產(chǎn)品英文名稱】 | Human hepatocyte growth factor,HGF ELISA kit | ||||||||
| 【保存溫度】 | 2-8℃，避光保存 | ||||||||
| 【產(chǎn)品規(guī)格】 | 96T/48T | ||||||||
| 【有效期】 | 6個月 | ||||||||
| 人肝細胞生長因子（HGF）ELISA 試劑盒 | |||||||||
| 操作流程 | |||||||||
| 1. 加入10 μL 校準品、質(zhì)控品、待測樣品到反應板孔內(nèi)； | |||||||||
| 2. 加入100 μL酶標抗體工作液到反應板孔內(nèi)； | |||||||||
| 3. 室溫搖床溫育120 min； | |||||||||
| 4. 洗板6次； | |||||||||
| 5. 加入1X底物工作液100 μL； | |||||||||
| 6. 室溫溫育15 min； | |||||||||
| 7. 加入100 μL終止液，搖勻約5 s； | |||||||||
| 8. 用波長325 nm/420 nm的激發(fā)/發(fā)射光檢測 | |||||||||
| 人肝細胞生長因子（HGF）ELISA 試劑盒 | |||||||||
| ELISA 試驗時，注意事項如下： | |||||||||
| 1. 正式試驗時，應分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件，待檢樣品應作一式二份，以保證實驗結(jié)果的準確性。 | |||||||||
| 有時本底較高，說明有非特異性反應，可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。 | |||||||||
| 2. 在ELISA中，進行各項實驗條件的選擇是很重要的，其中包括: | |||||||||
| （1） 固相載體的選擇：許多物質(zhì)可作為固相載體，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。 | |||||||||
| 其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體，在使用前均可進行篩選： | |||||||||
| 用等量抗原包被，在同一實驗條件下進行反應，觀察其顯色反應是否均一性，據(jù)此判明其吸附性能是否良好。 | |||||||||
| （2）包被抗體（或抗原）的選擇：將抗體（或抗原）吸附在固相載體表面時，要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0～9.6之間。 | |||||||||
| 吸附溫度，時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18～24小時。蛋白質(zhì)包被的適濃度需進行滴定： | |||||||||
| 即用不同的蛋白質(zhì)濃度（0.1、1.0和10μg／ml等）進行包被后,在其它試驗條件相同時，觀察陽性標本的OD值。 | |||||||||
| 選擇OD值大而蛋白量少的濃度。對于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1～10μg／ml。 | |||||||||
| （3） 酶標記抗體工作濃度的選擇：首先用直接ELISA法進行初步效價的滴定（見酶標記抗體部份）。 | |||||||||
| 然后再固定其它條件或采取“方陣法”（包被物、待檢樣品的參考品及酶標記抗體分別為不同的稀釋度） | |||||||||
| 在正式實驗系統(tǒng)里準確地滴定其工作濃度。 | |||||||||
| （4） 酶的底物及供氫體的選擇：對供氫體的選擇要求是價廉、安全、有明顯地顯色反應，而本身無色。 | |||||||||
| 有條件者應使用不致癌、靈敏度高的供氫體，如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時間后， | |||||||||
| 應加入強酸或強堿以終止反應。通常底物作用時間，以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制，尤其是H2O2在臨用前加入. | |||||||||
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更新時間：2024/11/26 14:28:39
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