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原產(chǎn)地：中國(guó)大陸發(fā)布時(shí)間：2013/7/15 15:07:15
采購(gòu)度：330
本產(chǎn)品僅供科研實(shí)驗(yàn)，不得用于醫(yī)療或食用。
| 【產(chǎn)品中文名稱】 | 人組織因子（TF）ELISA 試劑盒 | ||||||||
| 【產(chǎn)品英文名稱】 | Human Tissue factor,IF ELISA kit | ||||||||
| 【保存溫度】 | 2-8℃，避光保存 | ||||||||
| 【產(chǎn)品規(guī)格】 | 96T/48T | ||||||||
| 【有效期】 | 6個(gè)月 | ||||||||
| 人組織因子（TF）ELISA 試劑盒 | |||||||||
| 操作流程 | |||||||||
| 1. 加入10 μL 校準(zhǔn)品、質(zhì)控品、待測(cè)樣品到反應(yīng)板孔內(nèi)； | |||||||||
| 2. 加入100 μL酶標(biāo)抗體工作液到反應(yīng)板孔內(nèi)； | |||||||||
| 3. 室溫?fù)u床溫育120 min； | |||||||||
| 4. 洗板6次； | |||||||||
| 5. 加入1X底物工作液100 μL； | |||||||||
| 6. 室溫溫育15 min； | |||||||||
| 7. 加入100 μL終止液，搖勻約5 s； | |||||||||
| 8. 用波長(zhǎng)325 nm/420 nm的激發(fā)/發(fā)射光檢測(cè) | |||||||||
| 人組織因子（TF）ELISA 試劑盒 | |||||||||
| ELISA 試驗(yàn)時(shí)，注意事項(xiàng)如下： | |||||||||
| 1. 正式試驗(yàn)時(shí)，應(yīng)分別以陽(yáng)性對(duì)照與陰性對(duì)照控制試驗(yàn)條件，待檢樣品應(yīng)作一式二份，以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。 | |||||||||
| 有時(shí)本底較高，說(shuō)明有非特異性反應(yīng)，可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。 | |||||||||
| 2. 在ELISA中，進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)條件的選擇是很重要的，其中包括: | |||||||||
| （1） 固相載體的選擇：許多物質(zhì)可作為固相載體，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。 | |||||||||
| 其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體，在使用前均可進(jìn)行篩選： | |||||||||
| 用等量抗原包被，在同一實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行反應(yīng)，觀察其顯色反應(yīng)是否均一性，據(jù)此判明其吸附性能是否良好。 | |||||||||
| （2）包被抗體（或抗原）的選擇：將抗體（或抗原）吸附在固相載體表面時(shí)，要求純度要好,吸附時(shí)一般要求PH在9.0～9.6之間。 | |||||||||
| 吸附溫度，時(shí)間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18～24小時(shí)。蛋白質(zhì)包被的適濃度需進(jìn)行滴定：即用不同的蛋白質(zhì)濃度（0.1、1.0和10μg／ml等） | |||||||||
| 進(jìn)行包被后,在其它試驗(yàn)條件相同時(shí)，觀察陽(yáng)性標(biāo)本的OD值。選擇OD值大而蛋白量少的濃度。對(duì)于多數(shù)蛋白質(zhì)來(lái)說(shuō)通常為1～10μg／ml。 | |||||||||
| （3） 酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇：首先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價(jià)的滴定（見(jiàn)酶標(biāo)記抗體部份）。 | |||||||||
| 然后再固定其它條件或采取“方陣法”（包被物、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度）在正式實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度。 | |||||||||
| （4） 酶的底物及供氫體的選擇：對(duì)供氫體的選擇要求是價(jià)廉、安全、有明顯地顯色反應(yīng)，而本身無(wú)色。有些供氫體（如OPD等）有潛在的致癌作用，應(yīng)注意防護(hù)。 | |||||||||
| 有條件者應(yīng)使用不致癌、靈敏度高的供氫體，如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時(shí)間后，應(yīng)加入強(qiáng)酸或強(qiáng)堿以終止反應(yīng)。 | |||||||||
| 通常底物作用時(shí)間，以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制，尤其是H2O2在臨用前加入 具體事項(xiàng)請(qǐng)來(lái)電咨詢。 | |||||||||
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更新時(shí)間：2024/11/26 14:28:39
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