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      小鼠妊娠相關(guān)血漿蛋白A(PAPP-A)ELISA 試劑盒

      小鼠妊娠相關(guān)血漿蛋白A(PAPP-A)ELISA 試劑盒

      價(jià)格:電議 型號(hào):

      原產(chǎn)地:中國(guó)大陸發(fā)布時(shí)間:2013/7/31 19:37:05

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      本產(chǎn)品僅供科研實(shí)驗(yàn),不得用于醫(yī)療或食用。

      產(chǎn)品名稱: 小鼠妊娠相關(guān)血漿蛋白A(PAPP-A)ELISA 試劑盒
      產(chǎn)品英文名稱: Mouse pregnancy associated plasma protein A,PAPP-A ELISA kit
      樣品形式: 血清/血漿/細(xì)胞培養(yǎng)上清/其它生物液體/組織等(具體情況請(qǐng)咨詢)
      保存與運(yùn)輸: 2到8℃
      應(yīng)用范圍: 科研用檢測(cè)試劑
      小鼠妊娠相關(guān)血漿蛋白A(PAPP-A)ELISA 試劑盒
      操作步驟
      1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。
      8 nmol/L 5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl 的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
      4 nmol/L 4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl 的5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
      2 nmol/L 3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl 的4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
      1 nmol/L 2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl 的3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
      0.5 nmol/L 1 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl 的2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
       
      2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、
      待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,
      然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品終稀釋度為5 倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡
      量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。
      3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30 分鐘。
      4. 配液:將30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水30 倍稀釋后備用
      5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30 秒后棄去,如此重復(fù)5 次,拍干。
      6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
      7. 溫育:操作同3。
      8. 洗滌:操作同5。
      9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色
      10 分鐘.
      10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
      11. 測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm 波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD 值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
      小鼠妊娠相關(guān)血漿蛋白A(PAPP-A)ELISA 試劑盒
      操作程序總結(jié):
      計(jì)算
      以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD 值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的
      OD 值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD 值計(jì)算出標(biāo)
      準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD 值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),
      即為樣品的實(shí)際濃度。
      注意事項(xiàng)
      1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30 分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未
      用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
      2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
      3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間好
      控制在5 分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
      4. 請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,好做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過高(樣本OD 值
      大于標(biāo)準(zhǔn)品孔孔的OD 值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n 倍)后再測(cè)定,計(jì)
      算時(shí)請(qǐng)后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
      5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
      6.底物請(qǐng)避光保存。
      7.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
      8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
      9.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。
      小鼠妊娠相關(guān)血漿蛋白A(PAPP-A)ELISA 試劑盒
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