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本產(chǎn)品僅供科研實驗,不得用于醫(yī)療或食用。
產(chǎn)品名稱: | 小鼠環(huán)磷酸鳥苷(cGMP)ELISA 試劑盒 | ||||||
產(chǎn)品英文名稱: | Mouse Cyclic guanosine monophosphate,cGMP ELISA kit | ||||||
樣品形式: | 血清/血漿/細胞培養(yǎng)上清/其它生物液體/組織等(具體情況請咨詢) | ||||||
保存與運輸: | 2到8℃ | ||||||
應(yīng)用范圍: | 科研用檢測試劑 | ||||||
小鼠環(huán)磷酸鳥苷(cGMP)ELISA 試劑盒 | |||||||
操作步驟 | |||||||
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。 | |||||||
8 nmol/L 5 號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl 的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 | |||||||
4 nmol/L 4 號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl 的5 號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 | |||||||
2 nmol/L 3 號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl 的4 號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 | |||||||
1 nmol/L 2 號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl 的3 號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 | |||||||
0.5 nmol/L 1 號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl 的2 號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 | |||||||
2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、 | |||||||
待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl, | |||||||
然后再加待測樣品10μl(樣品終稀釋度為5 倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡 | |||||||
量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。 | |||||||
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30 分鐘。 | |||||||
4. 配液:將30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水30 倍稀釋后備用 | |||||||
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30 秒后棄去,如此重復(fù)5 次,拍干。 | |||||||
6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。 | |||||||
7. 溫育:操作同3。 | |||||||
8. 洗滌:操作同5。 | |||||||
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色 | |||||||
10 分鐘. | |||||||
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。 | |||||||
11. 測定:以空白空調(diào)零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應(yīng)在加終止液后15 分鐘以內(nèi)進行。 | |||||||
小鼠環(huán)磷酸鳥苷(cGMP)ELISA 試劑盒 | |||||||
操作程序總結(jié): | |||||||
計算 | |||||||
以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD 值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的 | |||||||
OD 值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD 值計算出標(biāo) | |||||||
準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD 值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù), | |||||||
即為樣品的實際濃度。 | |||||||
注意事項 | |||||||
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30 分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未 | |||||||
用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。 | |||||||
2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。 | |||||||
3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間好 | |||||||
控制在5 分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。 | |||||||
4. 請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線,好做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD 值 | |||||||
大于標(biāo)準(zhǔn)品孔孔的OD 值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n 倍)后再測定,計 | |||||||
算時請后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。 | |||||||
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。 | |||||||
6.底物請避光保存。 | |||||||
7.嚴(yán)格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn). | |||||||
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。 | |||||||
9.本試劑不同批號組分不得混用。 | |||||||
小鼠環(huán)磷酸鳥苷(cGMP)ELISA 試劑盒 | |||||||
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更新時間:2024/11/26 14:28:51
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