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      兔子白血病抑制因子受體(LIFR)ELISA 試劑盒

      兔子白血病抑制因子受體(LIFR)ELISA 試劑盒

      價格:電議 型號:

      原產(chǎn)地:中國大陸發(fā)布時間:2013/8/5 21:02:17

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      詳細內(nèi)容

      本產(chǎn)品僅供科研實驗,不得用于醫(yī)療或食用。

      產(chǎn)品名稱: 兔子白血病抑制因子受體(LIFR)ELISA 試劑盒
      產(chǎn)品英文名稱: rabbit leukemia inhibitory factor receptor,LIFR ELISA kit 
      規(guī)格: 48T/96T
      檢測方法: 雙抗體夾心酶聯(lián)免疫法(ELISA)
      標本: 血清,血漿,細胞上清液,組織等
      種屬: Rabbit /兔
      試劑盒說明書: 請來電或者郵件索取
       
      兔子白血病抑制因子受體(LIFR)ELISA 試劑盒
      實驗材料與試劑配制:
      1. 儀器與材料:酶標儀(使用前預熱30分鐘,微量加液器、吸頭、蒸餾水或去離子水,濾紙。
      2. 洗液的配制:按 1:100的比例配制洗液備用。 樣品收集、處理及保存
      1. 細胞培養(yǎng)上清:適用于檢測體外培養(yǎng)的細胞分泌性成份。用無菌管收集上清液,以1000×g離心15
      分鐘,收集上清。
      2. 細胞:用PBS反復洗滌細胞 3次,調(diào)整細胞濃度達到10^4-10^6/ml左右,通過反復凍融,
      使細胞破壞,并放出細胞內(nèi)成份;蛘呒毎暦鬯椋x心取上清液檢測。
      3. 血清: 在室溫 下, 血液自然凝固,以1000×g離心15分鐘,取上清待測。
      4. 血漿:應根據(jù)標本的要求選擇 EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合后靜置 10 -20 分鐘后,
      以1000×g離心15分鐘,收集上清。
      5. 體液:包括胸腹水、腦脊液,分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集 ,以 1000×g
      離心、15 分鐘 ,收集上清。
      6. 組織標本:切取 組織標本,稱取重量0.5mg加入500ul 的PBS,用手工或勻漿器,超聲破碎儀,
      將標本勻漿,以2000 -300rmp離心 20 分鐘 ,收集上清進行檢測 。
      7. 樣品 中不能含有 NaN3,因 NaN3抑制辣根過氧化物酶的( HRP)活性。
      8. 保存 :如果樣品不能立即檢測,應將其分裝,-80 ℃保存,避免反復冷凍。保存過程中如出現(xiàn)
      沉淀,應再次離心。血液標本盡可能的不要使用溶血或高脂。如果血清中含大量顆粒,檢測前先離心
      或過濾。不要在 37 ℃或更高的溫度加熱解 或更高的溫度加熱解 或更高的溫度加熱解或更高的溫度
      加熱解或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解并確保樣品均勻地充分解凍。
      兔子白血病抑制因子受體(LIFR)ELISA 試劑盒
      操作步驟 :
      1. 取出 試劑盒,室溫( 20 -25 ℃)放置 30 分鐘。
      2. 分組: 取出 96 孔板 根據(jù)待測樣品數(shù) 量加上標準品的數(shù)量決定所需板條,把剩余的板條繼續(xù)
      冷藏處理,分別設標準品組(6個濃度)、空白 孔、待測樣品組。 
      注:為減少實驗誤差,保證準確性,建議設置復孔。
      3. 加樣:依照標準品的順序分別加入100ul 的標準品溶液于空白微孔中;空白對照孔加入100ul的
      蒸餾水;其余微孔中加入100ul的待測樣本。
      4. 加酶標溶液:標準品組、待測樣本組各孔中加入50ul 的酶標溶液 (空白對照孔除外)。
      5. 溫育:酶標板用封板紙密封后,放入濕盒內(nèi)于 37 ℃恒溫孵育恒溫孵育 1小時。
      6. 洗板:用稀釋后的洗滌液注滿每孔,靜置15 -30s 30s,充分清洗酶標板5次,用吸水紙徹底拍干。
      7. 顯色:各孔加入顯色劑A液 50ul 后,再加入顯色劑 B液 50ul 。
      8. 終止: 25 -37 ℃下避光反應10 -15分鐘, 加入 50 ul 終止液。
      9. 讀板:在 450nm波長讀取各孔的O 值。注: 讀板時必須拭干板底殘留的液體和手指痕跡,
      讀板時間控制在終止反應后的30 分鐘內(nèi),以免影響準確性。
      兔子白血病抑制因子受體(LIFR)ELISA 試劑盒
      數(shù)據(jù)計算
      1. 繪制標準曲線:各標準品 OD 值減去底色即堅強空白孔OD 值(數(shù)據(jù)處理如下),繪制標準曲線圖。
      1.1軟件處理:建議用戶使logit-log模式或四參數(shù)據(jù)處理模式( y=(a-d)/(1+(x/c)^b)+d )
      1.2計算器或手工作圖處理:Logit-log 計算:以6個標準品OD 值的 Logit為縱坐標 y,以標準品的
      濃度的 log值為橫坐標X,繪制曲線圖。logit值計算公式如下:logit=ln(B/ B0)(1-B/ B0)手工
      作圖:以標準濃度取log值為橫坐標,對應的logit值為縱坐標,在普通坐標紙上或以標準濃度為
      橫坐標,對應的 B/B0B為縱坐標在 logit-log坐標紙上畫出標準曲線(理想化時是一條直)。
      2. 根據(jù)待測樣品的B/B0可以從坐標紙上查出樣品的濃度值。注意:如果使用普通坐標紙,查出的
      數(shù)值應取反對數(shù)才是后濃度值。 
      3.敏感度:1.0µmol/L
      兔子白血病抑制因子受體(LIFR)ELISA 試劑盒
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      上海信帆實驗室代測項目:放免代測,免疫組化代測,熒光定量PCR代測,病理細胞染色代測,
      WB實驗,蛋白表達與純化,ELISA酶聯(lián)免疫代測等

      更新時間:2024/11/26 14:29:03

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