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      產(chǎn)品展示

      大鼠γ干擾素(IFN-γ)ELISA 試劑盒

      大鼠γ干擾素(IFN-γ)ELISA 試劑盒

      價格:電議 型號:

      原產(chǎn)地:中國大陸發(fā)布時間:2013/8/7 22:01:07

      上海信帆生物是國內(nèi)專業(yè)的elisa試劑盒代理廠商,品牌齊全,種類豐富!有專業(yè)的技術(shù)部門,提供技術(shù)服務(wù),產(chǎn)品質(zhì)量保證,有問題,包退包換,提供免費(fèi)代測服務(wù),歡迎搶購!

      采購度:258

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      標(biāo)簽:大鼠γ干擾素   IFN-γ   

      詳細(xì)內(nèi)容

      本產(chǎn)品僅供科研實(shí)驗(yàn),不得用于醫(yī)療或食用。

      產(chǎn)品名稱: 大鼠γ干擾素(IFN-γ)ELISA 試劑盒
      產(chǎn)品英文名稱: Rat Interferon γ ,IFN-γ ELISA kit
      規(guī)格: 48T/96T
      檢測方法: 雙抗體夾心酶聯(lián)免疫法(ELISA)
      標(biāo)本: 血清,血漿,細(xì)胞上清液,組織等
      種屬: Rat\鼠
      試劑盒說明書: 請來電或者郵件索取
       
      大鼠γ干擾素(IFN-γ)ELISA 試劑盒
      實(shí)驗(yàn)材料與試劑配制:
      1. 儀器與材料:酶標(biāo)儀(使用前預(yù)熱30分鐘,微量加液器、吸頭、蒸餾水或去離子水,濾紙。
      2. 洗液的配制:按 1:100的比例配制洗液備用。 樣品收集、處理及保存
      1. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:適用于檢測體外培養(yǎng)的細(xì)胞分泌性成份。用無菌管收集上清液,以1000×g離心15
      分鐘,收集上清。
      2. 細(xì)胞:用PBS反復(fù)洗滌細(xì)胞 3次,調(diào)整細(xì)胞濃度達(dá)到10^4-10^6/ml左右,通過反復(fù)凍融,
      使細(xì)胞破壞,并放出細(xì)胞內(nèi)成份。或者細(xì)胞超聲粉碎,離心取上清液檢測。
      3. 血清: 在室溫 下, 血液自然凝固,以1000×g離心15分鐘,取上清待測。
      4. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇 EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合后靜置 10 -20 分鐘后,
      以1000×g離心15分鐘,收集上清。
      5. 體液:包括胸腹水、腦脊液,分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集 ,以 1000×g
      離心、15 分鐘 ,收集上清。
      6. 組織標(biāo)本:切取 組織標(biāo)本,稱取重量0.5mg加入500ul 的PBS,用手工或勻漿器,超聲破碎儀,
      將標(biāo)本勻漿,以2000 -300rmp離心 20 分鐘 ,收集上清進(jìn)行檢測 。
      7. 樣品 中不能含有 NaN3,因 NaN3抑制辣根過氧化物酶的( HRP)活性。
      8. 保存 :如果樣品不能立即檢測,應(yīng)將其分裝,-80 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。保存過程中如出現(xiàn)
      沉淀,應(yīng)再次離心。血液標(biāo)本盡可能的不要使用溶血或高脂。如果血清中含大量顆粒,檢測前先離心
      或過濾。不要在 37 ℃或更高的溫度加熱解 或更高的溫度加熱解 或更高的溫度加熱解或更高的溫度
      加熱解或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解并確保樣品均勻地充分解凍。
      大鼠γ干擾素(IFN-γ)ELISA 試劑盒
      操作步驟 :
      1. 取出 試劑盒,室溫( 20 -25 ℃)放置 30 分鐘。
      2. 分組: 取出 96 孔板 根據(jù)待測樣品數(shù) 量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需板條,把剩余的板條繼續(xù)
      冷藏處理,分別設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品組(6個濃度)、空白 孔、待測樣品組。 
      注:為減少實(shí)驗(yàn)誤差,保證準(zhǔn)確性,建議設(shè)置復(fù)孔。
      3. 加樣:依照標(biāo)準(zhǔn)品的順序分別加入100ul 的標(biāo)準(zhǔn)品溶液于空白微孔中;空白對照孔加入100ul的
      蒸餾水;其余微孔中加入100ul的待測樣本。
      4. 加酶標(biāo)溶液:標(biāo)準(zhǔn)品組、待測樣本組各孔中加入50ul 的酶標(biāo)溶液 (空白對照孔除外)。
      5. 溫育:酶標(biāo)板用封板紙密封后,放入濕盒內(nèi)于 37 ℃恒溫孵育恒溫孵育 1小時。
      6. 洗板:用稀釋后的洗滌液注滿每孔,靜置15 -30s 30s,充分清洗酶標(biāo)板5次,用吸水紙徹底拍干。
      7. 顯色:各孔加入顯色劑A液 50ul 后,再加入顯色劑 B液 50ul 。
      8. 終止: 25 -37 ℃下避光反應(yīng)10 -15分鐘, 加入 50 ul 終止液。
      9. 讀板:在 450nm波長讀取各孔的O 值。注: 讀板時必須拭干板底殘留的液體和手指痕跡,
      讀板時間控制在終止反應(yīng)后的30 分鐘內(nèi),以免影響準(zhǔn)確性。
      大鼠γ干擾素(IFN-γ)ELISA 試劑盒
      數(shù)據(jù)計算
      1. 繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線:各標(biāo)準(zhǔn)品 OD 值減去底色即堅強(qiáng)空白孔OD 值(數(shù)據(jù)處理如下),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線圖。
      1.1軟件處理:建議用戶使logit-log模式或四參數(shù)據(jù)處理模式( y=(a-d)/(1+(x/c)^b)+d )
      1.2計算器或手工作圖處理:Logit-log 計算:以6個標(biāo)準(zhǔn)品OD 值的 Logit為縱坐標(biāo) y,以標(biāo)準(zhǔn)品的
      濃度的 log值為橫坐標(biāo)X,繪制曲線圖。logit值計算公式如下:logit=ln(B/ B0)(1-B/ B0)手工
      作圖:以標(biāo)準(zhǔn)濃度取log值為橫坐標(biāo),對應(yīng)的logit值為縱坐標(biāo),在普通坐標(biāo)紙上或以標(biāo)準(zhǔn)濃度為
      橫坐標(biāo),對應(yīng)的 B/B0B為縱坐標(biāo)在 logit-log坐標(biāo)紙上畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線(理想化時是一條直)。
      2. 根據(jù)待測樣品的B/B0可以從坐標(biāo)紙上查出樣品的濃度值。注意:如果使用普通坐標(biāo)紙,查出的
      數(shù)值應(yīng)取反對數(shù)才是后濃度值。 
      3.敏感度:1.0µmol/L
      大鼠γ干擾素(IFN-γ)ELISA 試劑盒
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      上海信帆實(shí)驗(yàn)室代測項目:放免代測,免疫組化代測,熒光定量PCR代測,病理細(xì)胞染色代測,
      WB實(shí)驗(yàn),蛋白表達(dá)與純化,ELISA酶聯(lián)免疫代測等

      更新時間:2024/11/26 14:29:15

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