血漿腎素活性(PRA)的測(cè)定是以血管緊張素Ⅰ (AⅠ)產(chǎn)生的速率來(lái)表示的。血漿中加入酶抑制劑來(lái)抑制轉(zhuǎn)化酶和血管緊張素酶的活性,AⅠ不再進(jìn)一步降解,使測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確。PRA的測(cè)定是取雙份血漿,一份血漿在 37℃溫育一小時(shí),使腎素作用于血管緊張素原產(chǎn)生 AⅠ作為測(cè)定管,另一份血漿在 4℃放置作為對(duì)照管。應(yīng)用放射免疫分析法 AⅠ的濃度減去對(duì)照管 AⅠ的濃度,被溫育時(shí)間除之,則為單位時(shí)間內(nèi) AⅠ產(chǎn)生的速率,稱為腎素活性。本標(biāo)記物為 125I-AⅠ,采用免疫分離劑分離,快速﹑方便﹑準(zhǔn)確。
腎素是由腎臟近球體細(xì)胞產(chǎn)生的分子量為 40000 的一種羧基蛋白水解酶。它作用于血管緊張素原產(chǎn)生血管素Ⅰ(AⅠ10 肽)。AⅠ在轉(zhuǎn)化酶的作用下形成血管緊張素(AⅡ 8 肽)。腎素-血管緊張素系統(tǒng)有多種生理功能。在調(diào)節(jié)血壓、水和電解質(zhì)平衡代謝過(guò)程中起著重要作用。另外,它與一些腎臟疾病及與腎臟有關(guān)的一些疾病有密切關(guān)系。血漿腎素活性(PRA)和 AⅡ濃度的測(cè)定已成為原發(fā)性和繼發(fā)性高血壓分型診斷、治療及研究的重要指標(biāo)。對(duì)一些有關(guān)腎臟疾病的診斷、治療以及發(fā)病機(jī)理的探討有著重要的意義。
注意事項(xiàng)(Attention):血樣的采集和保存
1) 待穩(wěn)定后,坐姿采集肘靜脈血 2 mL,迅速注入在冰水浴中冷卻的含 20 μL EDTA 的試管中,搖勻,放冰水浴中冷卻后,在 1000 轉(zhuǎn)/分離心 5 分鐘( 4℃離心),分離血漿,取血漿 1 mL 放入另一支已預(yù)冷的含有 10 μL 酶抑制劑 1 和 20 μL 酶抑制劑 2 的試管中搖勻,立即測(cè)定或置–20℃冰箱保存,可用兩周。
2) 激發(fā)試驗(yàn),在基礎(chǔ)狀態(tài)采血后,給肌肉注射速尿(0.7 mg/Kg 體重)?倓┝坎怀^(guò) 50mg,保持立位不飲水,兩小時(shí)后坐姿采血。
注意:注射速尿后兩小時(shí)內(nèi)隨尿排出的水電解質(zhì)較多,如血鉀過(guò)低,試血前應(yīng)適當(dāng)給予補(bǔ)充,試驗(yàn)過(guò)程中可能出現(xiàn)口渴、無(wú)力、出汗等,一般不重,如過(guò)重應(yīng)酌情終止試驗(yàn),讓平臥,并給予糖鹽茶水。
3) β-阻斷劑、血管擴(kuò)張劑、利尿劑及甾體激素、甘草等影響體內(nèi)腎素水平。
4) 鈉攝入量影響機(jī)體 PRA 水平,測(cè)定 PRA 三天前應(yīng)適當(dāng)減少鈉鹽攝入量,應(yīng)測(cè)定取血前 24 小時(shí)尿鈉的含量,以供分析 PRA 結(jié)果時(shí)參考。
血管緊張素Ⅰ放免實(shí)驗(yàn)代測(cè)