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孕酮(PROG)放免檢測(cè)試劑盒
孕酮是主要的孕激素,與雌激素協(xié)同作用。測(cè)定血清孕酮是判斷動(dòng)物性激素疾病的常用試驗(yàn)
簡(jiǎn)介
實(shí)驗(yàn)開始前,請(qǐng)?zhí)崆芭渲煤盟性噭,試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。每次檢測(cè)都應(yīng)該做標(biāo)準(zhǔn)曲線。如樣品濃度過高時(shí),用樣品稀釋液進(jìn)行稀釋,以使樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔?瞻卓准訕悠废♂屢100μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。
為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2.棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加生物素標(biāo)記抗體工作液 100μl(取1μl生物素標(biāo)記抗體加99μl生物素標(biāo)記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),37℃,60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
4.每孔加辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素工作液(同生物素標(biāo)記抗體工作液) 100μl,37℃,60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度藍(lán)色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7.依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度(OD值)。 在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。
妊烯醇酮氧化得到。將干燥的甲苯加入干燥的反應(yīng)鍋內(nèi),加入環(huán)已酮及妊烯醇酮,攪拌溶解,蒸甲苯脫水至盡,迅速加入異丙醇鋁,于115℃氧化反應(yīng)2h,冷卻至80℃左右,在攪拌下加入5%稀硫酸,靜置分層,分去水層,甲苯層用水洗至中性后進(jìn)行水蒸氣蒸餾,蒸出甲苯及環(huán)已酮。冷卻,過濾,濾渣用石油醚攪成漿狀,過濾,以石油醚洗滌,干燥得黃ti酮粗品。粗品溶于乙醇,用活性炭脫色,重結(jié)晶成品,收率80%。
信帆生物提供血清孕酮放免試劑盒免費(fèi)待測(cè),提供實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù),包括所有試劑,提供分析數(shù)據(jù)、步驟等,如果你想了解該實(shí)驗(yàn)服務(wù)的詳細(xì)信息,咨詢!
孕酮(PROG)放免檢測(cè)
更新時(shí)間:2024/11/26 14:31:28
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