聯(lián) 系 人：莫經(jīng)理
電 話：4008-013-053
手 機：13764793648
地 址：上海市閔行區(qū)顧戴路2988號7樓
郵 編：200000
傳 真：021-51870610
郵 箱：1170233632@qq.com
阿儀網(wǎng)商鋪：http://www.app17.com/c85413/
手機網(wǎng)站：m.shxfbio.com
點擊次數(shù)：427 發(fā)布時間：2015/8/5 10:38:08
· 上 傳 者： 上海信帆生物科技有限公司
· 上傳時間：2015/8/5 10:38:08
· 文件大小：2KB
· 文件類型：png
· 所屬分類：其它資料
· 下載次數(shù)：323次
· 查看次數(shù)：427
· 資料簡介： 人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子(VEGF)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書
本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍： 48T40pg/ml-1200pg/ml使用目的：本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子(VEGF)含量。實驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子(VEGF)水平。用純化的血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子(VEGF)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子(VEGF)，再與HRP 標(biāo)記的人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子(VEGF)抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB 顯色。TMB 在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成*終的黃色。顏色的深淺和樣品中的血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子(VEGF)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子(VEGF)濃度。試劑盒組成1 20 倍濃縮洗滌液20ml×1 瓶7 終止液3ml×1 瓶2 酶標(biāo)試劑3ml×1 瓶8 標(biāo)準(zhǔn)品（2400pg/ml） 0.5ml×1 瓶3 酶標(biāo)包被板12 孔×4 條9 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1 瓶4 樣品稀釋液3ml×1 瓶10 說明書1 份5 顯色劑A 液3ml×1 瓶11 封板膜2 張6 顯色劑B 液3ml×1/瓶12 密封袋1 個標(biāo)本要求1．標(biāo)本采集后盡早進行提取，提取按相關(guān)文獻進行，提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融2．不能檢測含NaN3 的樣品，因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。操作步驟1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。1200pg/ml 5 號標(biāo)準(zhǔn)品150μl 的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液600pg/ml 4 號標(biāo)準(zhǔn)品150μl 的5 號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液300pg/ml 3 號標(biāo)準(zhǔn)品150μl 的4 號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液150pg/ml 2 號標(biāo)準(zhǔn)品150μl 的3 號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液75pg/ml 1 號標(biāo)準(zhǔn)品150μl 的2 號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液2. 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品*終稀釋度為5 倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30 分鐘。4. 配液：將20 倍濃縮洗滌液用蒸餾水20 倍稀釋后備用5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30 秒后棄去，如此重復(fù)5 次，拍干。6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。7. 溫育：操作同3。8. 洗滌：操作同5。9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15 分鐘.10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。11. 測定：以空白空調(diào)零，450nm 波長依序測量各孔的吸光度（OD 值）。測定應(yīng)在加終止液后15 分鐘以內(nèi)進行。操作程序總結(jié)：計算以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)，OD 值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)樣品的OD 值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD 值計算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD 值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實際濃度。注意事項1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30 分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2．濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果。3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5 分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。4． 請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線，做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD 值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔孔的OD 值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n 倍）后再測定，計算時請*后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物請避光保存。7．嚴(yán)格按照說明書的操作進行，試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9．本試劑不同批號組分不得混用。10. 如與英文說明書有異，以英文說明書為準(zhǔn)。保存條件及有效期1．試劑盒保存：；2-8℃。2．有效期：6 個月
首 頁| 公司介紹| 產(chǎn)品展示| 公司新聞| 榮譽證書| 資料下載| 技術(shù)文章| 聯(lián)系我們| 客戶留言
阿儀網(wǎng) 設(shè)計制作，未經(jīng)允許翻錄必究.
聯(lián)系人：莫經(jīng)理 聯(lián)系電話：4008-013-053 ICP備案號：滬ICP備13019554號
總訪問量：4977048 管理登錄
主營產(chǎn)品：實驗代測 免疫組化檢測 PCR檢測 elisa試劑盒 抗體抗原 動物血清制品
掃一掃，關(guān)注我們
