實(shí)驗(yàn)室代測(cè)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目

細(xì)胞分離液試劑盒使用注意事項(xiàng)以及操作步驟詳解

點(diǎn)擊次數(shù)：593 發(fā)布時(shí)間：2015/8/24 14:25:20

· 上傳者：上海信帆生物科技有限公司

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人或各種動(dòng)物外周血及臟器組織單核細(xì)胞分離液試劑盒

規(guī)格：2×100ml/kit
保存：室溫避光儲(chǔ)存

試劑盒內(nèi)容：試劑：全血及組織稀釋液100ml試劑：細(xì)胞洗滌液100ml試劑A100ml試劑D100ml說明書1 份一、分離方法說明及圖例二、A．在10ml或15ml玻璃離心管中依次小心加入A、D兩種液體各2ml，制成梯度界面（各液面分層一定要清晰）；B．取 1ml新鮮抗凝血或組織單細(xì)胞懸液（細(xì)胞濃度為2×108-1×109個(gè)/ml）按1：1比例與全血及組織稀釋液混勻并小心疊加于D液之液面上； C．以400g（約1500轉(zhuǎn)/分）離心15分鐘(半徑15cm水平轉(zhuǎn)子)；此時(shí)離心管中由上至下細(xì)胞分為六層。層：為血漿（稀釋液）層。第二層：為單核細(xì)胞層。第三層：為透明D液層。第四層：為淋巴細(xì)胞層。第五層：為透明A液層。第六層：為極少量紅細(xì)胞層。收集第二層單核細(xì)胞放入含4-5ml細(xì)胞洗滌液的試管中，充分混勻后，以500g（約1500轉(zhuǎn)/分）離心20分鐘，棄去上清留沉淀細(xì)胞重新懸起。重復(fù)洗滌2次即得所需單核細(xì)胞。注：提取率約為80%。

分離圖例：見說明書
二、注意事項(xiàng)A．本分離液是敏光型的，在運(yùn)輸和貯藏過程中應(yīng)在18℃-25℃避光保存，啟封后置4℃保存避免微生物污染。另外，本品為真空包裝，未啟封前置于10℃ 以下易出現(xiàn)白色結(jié)晶，影響分離效果。B．待分離的樣本要求新鮮，避免冷凍和冷藏。分離液和所分離樣本一定在20℃水浴箱中復(fù)溫20 分鐘保證分離液和所分離樣本溫度在20℃±2℃時(shí)分離效果，且所有操作過程一定要在無菌條件下進(jìn)行。C．由于各品牌離心機(jī)的性能不同，國內(nèi)南北地區(qū)溫度環(huán)境和四季的差異，可能影響分離效果，用戶可以調(diào)節(jié)離心轉(zhuǎn)數(shù)，調(diào)節(jié)離心的時(shí)間，摸索*佳的分離條件（具體分離條件各實(shí)驗(yàn)室自定）。D．使用無靜電反應(yīng)的離心管，推薦使用未經(jīng)過堿處理的玻璃離心管。三、產(chǎn)品性能指標(biāo)pH7.0-7.5滲透壓280-340mOsmol/kg內(nèi)毒素≤0.5EU/ml無菌直接接種培養(yǎng)14 天后培養(yǎng)基澄清澄明度及不溶性顆粒物每50ml 溶液中含10μm 以上的不溶性微粒20 粒以下，含25μm 以上的不溶性微粒5 粒以下四、貯藏及保存期限18℃-25℃避光保存，有效期兩年。啟封后置4℃保存，有效期一周。
注：若保證無微生物污染，啟封后可置4℃長期保存。但應(yīng)注意保存溫度較低時(shí)本分離液易出現(xiàn)白色結(jié)晶，影響分離效果。