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· 上 傳 者： 上海信帆生物科技有限公司
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· 資料簡介： 游離脂肪酸（free fatty acid，FFA）含量測定試劑盒說明書 FFA 既是脂肪水解的產(chǎn)物，又是脂肪合成的底物。FFA 的濃度與脂類代謝、糖代謝、內(nèi)分泌 功能有關(guān)，也可反映食物貯藏中的品質(zhì)變化。 在弱酸性條件下，FFA 與銅鹽反應(yīng)生成銅皂，在 715nm 處有特征吸收峰，在一定范圍內(nèi)游 離脂肪酸含量與顯色程度呈線性關(guān)系。 自備儀器和用品： 試劑一：液體×1 瓶，4℃保存。 1、 血液：將所取血液，室溫靜置 1 h 后，于 4 ℃ 離心機(jī) 3500 rpm 離心 15min，取上清 0.1mL， 加 1.2mL 試劑一，震蕩提取 3h，8000rpm，4℃離心 10min，取上清液待測。 2、 組織：組織用蒸餾水沖洗干凈后，用吸水紙吸取表面水分，搗碎后稱取約 0.1g 轉(zhuǎn)移至離 心管，按照組織質(zhì)量（g）：試劑一體積(mL)為 1：12 的比例加入試劑一，震蕩提取 3h， 8000rpm，4℃離心 10min，取上清液待測。 3、 細(xì)菌、真菌：按照細(xì)胞數(shù)量（104 個(gè)）：試劑一體積（mL）為 500~1000：1.2 的比例（建 議 500 萬細(xì)胞加入 1.2mL 試劑一）加入試劑一，冰浴超聲波破碎細(xì)胞（功率 300w，超 聲 2 秒，間隔 3 秒，總時(shí)間 3min）；震蕩提取 3h，然后 8000rpm，4℃，離心 10min，取 上清待測。 1. 分光光度計(jì)預(yù)熱 30 min 以上，調(diào)節(jié)波長到 715 nm。 2. 對照管：取上清液 1mL，加 0.5mL 試劑二，充分震蕩 5min，室溫靜置 5min，取上層 0.8mL 于 1mL 玻璃比色皿，調(diào)零。 3. 測定管：取上清液 1mL，加 0.5mL 試劑三，充分震蕩 5min，室溫靜置 5min，取上層 0.8mL 于 1mL 玻璃比色皿，測定吸光值，記為 A。 記為 A 測定管。 1.血液中 FFA 含量計(jì)算 FFA（μ mol/L）=(A-0.0055)÷0.0075×V 反總÷V 樣=1333×(A-0.0055) 2. 組織中 FFA 含量計(jì)算 （1）按樣本蛋白濃度計(jì)算 FFA（μ mol/mg prot）=(A-0.0055)÷0.0075×V 反總÷(V 樣×Cpr)= 0.133×(A-0.0055)÷Cpr （2）按樣本質(zhì)量計(jì)算 FFA（μ mol/g）= (A-0.0055)÷0.0075×V 反總÷(V 樣÷V 樣總×W)= 0.16×(A-0.0055)÷W 3. 按細(xì)胞數(shù)量計(jì)算 FFA（μ mol/104 cell）= (A-0.0055)÷0.0075×V 反總÷(V 樣÷V 樣總×細(xì)胞數(shù)量) = 0.16×(A-0.0055)÷細(xì)胞數(shù)量 V 樣總：上清液總體積，1.2 mL；V 反總：反應(yīng)總體積，1mL；V 樣：加入樣本體積，1mL； W：樣本鮮重，g；Cpr：樣本蛋白濃度，mg/mL elisa試劑盒,elisa kit,上海elisa實(shí)驗(yàn)代測,SOD試劑盒,IgG試劑盒,IgM試劑盒,WB實(shí)驗(yàn)代做,免疫組化實(shí)驗(yàn)代做,放免實(shí)驗(yàn)代測,GIBCO,AMRESCO-上海信帆生物
測定意義：測定原理：
研缽、臺式離心機(jī)、可見分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿。
試劑組成和配制：
試劑二：液體×1 瓶，4℃保存。
試劑三：液體×1 瓶，4℃保存。
樣品中 FFA 提�。�測定操作：
FFA 含量計(jì)算：
標(biāo)準(zhǔn)曲線：y=0.0075 x+ 0.0055，R2=0.994
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