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· 資料簡介: 褪黑素放射免疫試劑盒操作說明書 褪黑素(Melatonin MT),是松果體分泌的一種吲哚胺類激素,分子量為232.3 De, 其主要生物學作用:(1)傳遞光暗信號,使生物的各種內(nèi)源性節(jié)律與環(huán)境周期保持同步;(2)有效清除生物體內(nèi)的自由基,使機體免受氧化損傷;(3)褪黑素與鈣調(diào)蛋白結(jié)合,調(diào)節(jié)細胞骨架的機能狀態(tài),以執(zhí)行特定的機能;(4)具有鎮(zhèn)痛、鎮(zhèn)靜、催眠及調(diào)節(jié)神經(jīng)系統(tǒng)、內(nèi)分泌系統(tǒng)、保護消化道,促進睡眠和毛皮生長的激素。 主要應(yīng)用范圍: * 抗衰老、抗癌癥作用的機制研究; * 心腦血管、神經(jīng)系統(tǒng)、內(nèi)分泌系統(tǒng)疾病方面的研究; * 免疫功能、生物節(jié)律方面研究的參考; * 生長發(fā)育、性功能和許多器管起調(diào)節(jié)作用的指標。 試劑盒組成: 1、 緩沖液1瓶; 2、 褪黑素標準(凍干品)5瓶;10,50,100,200,400pg/ml 3、 125I-褪黑素2瓶; 4、 褪黑素抗血清2瓶; 5、 分離劑1瓶; 樣品收集:取靜脈血2ml ,注入試管中待凝固后,分離血清,-20℃保存2個月。測定前置室溫或冷水中復融,混勻后,4℃ 3000rpm/ min離心5 min,取上清測定。 測定方法: 本實驗采用平衡法,取聚苯乙烯試管編號,按下表操作: MT RIA加液程序 (單位: ul ) ———————————————————————————— 試 劑 T NSB B0 S1~S8 樣 品 ———————————————————————————— 緩 沖 液 —— 100 100 —— —— 標 準 品 —— —— —— 100 —— 樣 品 —— —— —— —— 100 抗 體 —— —— 100 100 100 125I-MT 100 100 100 100 100 ———————————————————————————— 充分混勻,室溫放置1小時,置4℃冰箱過夜。 ———————————————————————————— 分 離 劑 —— 500 500 500 500 ———————————————————————————— 振蕩混勻后,4℃冰箱放置1小時,4℃,4000 轉(zhuǎn)/分 離心45 min,棄上清液,測沉淀cpm數(shù)。 結(jié)果計算: 以N/T、B/T計算NBS、S0結(jié)合百分率,以B/B0計算標準及待測樣品結(jié)合百分率, 在半對數(shù)坐標紙上繪制標準曲線,并查出樣品值;蛴勺詣γ計數(shù)器預先編制程序,直接給出有關(guān)參數(shù),標準曲線及樣品濃度。 注意事項: 本月標準品每瓶用 ml緩沖液稀釋 本月藥盒抗體每瓶用 ml緩沖液稀釋 本月藥盒標記每瓶用 ml緩沖液稀釋 本月藥盒有效期為一個月,分離劑在使用前充分混勻(不可冰凍) 正常值:正常人空腹46.1±11.2pg/ml(X±SD). 本藥盒主要技術(shù)參數(shù): 1、NSB<5% 2、標準范圍:0-400 pg/ml 3、靈敏度:<0.5pg/ml 4、精密度:批內(nèi)變異系數(shù):CVw<4.5 %, 5、批間變異系數(shù):CVw <8.5% 6、平均回收率:97.5% 7、正常參考值:各實驗室應(yīng)根據(jù)自己的條件建立自己的正常對照組。 46.1±11.2pg/ml(n=188)。 有效日期:1個月
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